ПГУ буюу полимеразын гинжин урвал нь ДНХ-ийн дарааллыг олшруулахад ашигладаг арга юм.Үүнийг анх 1980-аад онд бүтээсэн бүтээлээрээ 1993 онд химийн салбарт Нобелийн шагнал хүртсэн Кари Муллис бүтээжээ.ПГУ нь молекул биологид хувьсгал хийж, судлаачдад жижиг дээжээс ДНХ-г олшруулж, нарийвчлан судлах боломжийг олгосон.
ПГУ нь урвалын хольцын температурыг хурдан өөрчлөх чадвартай дулааны циклаторт явагддаг гурван үе шаттай процесс юм.Гурван үе шат нь денатураци, анивалт, сунгалт юм.
Эхний алхам болох денатураци нь хоёр хэлхээтэй ДНХ-ийг өндөр температурт (ихэвчлэн 95 ° C орчим) халааж, хоёр хэлхээг холбосон устөрөгчийн холбоог тасалдаг.Үүний үр дүнд хоёр нэг хэлхээтэй ДНХ молекул үүсдэг.
Хоёрдахь үе шат болох анивчилгааны үед температурыг ойролцоогоор 55 ° C хүртэл бууруулж, праймеруудыг нэг судалтай ДНХ-ийн нэмэлт дарааллаар нөхөх боломжийг олгоно.Праймерууд нь зорилтот ДНХ-ийн сонирхлын дарааллыг тохируулах зорилготой ДНХ-ийн богино хэсгүүд юм.
Гурав дахь алхам болох өргөтгөлөөр температурыг ойролцоогоор 72 ° C хүртэл өсгөж, Так полимераза (ДНХ полимеразын нэг төрөл) праймеруудаас ДНХ-ийн шинэ хэлхээг нэгтгэх боломжийг олгоно.Так полимераза нь халуун рашаанд амьдардаг нянгаас гаралтай бөгөөд ПГУ-д хэрэглэгддэг өндөр температурыг тэсвэрлэх чадвартай.
ПГУ-ын нэг мөчлөгийн дараа үр дүн нь зорилтот ДНХ-ийн дарааллын хоёр хуулбар юм.Гурван алхмыг хэд хэдэн мөчлөгт (ихэвчлэн 30-40) давтан хийснээр зорилтот ДНХ-ийн дарааллын хуулбарын тоог экспоненциалаар нэмэгдүүлэх боломжтой.Энэ нь өчүүхэн ч гэсэн эхлэлийн ДНХ-ийг олшруулж сая сая, бүр тэрбум хувь үйлдвэрлэх боломжтой гэсэн үг юм.
ПГУ нь судалгаа, оношлогоонд олон төрлийн хэрэглээтэй.Генетикийн шинжлэх ухаанд ген, мутацийн үйл ажиллагааг судлах, шүүх шинжилгээнд ДНХ-ийн нотолгоонд дүн шинжилгээ хийх, халдварт өвчний оношлогоонд эмгэг төрүүлэгчийг илрүүлэх, пренатал оношлогоонд ургийн удамшлын эмгэгийг илрүүлэх зорилгоор ашигладаг.
ПГУ-ыг мөн тоон ПГУ (qPCR), ДНХ-ийн хэмжээг хэмжих, РНХ-ийн дарааллыг олшруулахад ашиглаж болох урвуу транскрипцийн ПГУ (RT-PCR) гэх мэт олон хувилбарт ашиглахаар тохируулсан.
Олон тооны хэрэглээтэй хэдий ч ПГУ нь хязгаарлалттай байдаг.Энэ нь зорилтот дараалал, тохирох праймерын дизайны талаархи мэдлэгийг шаарддаг бөгөөд урвалын нөхцлийг зөв оновчтой болгохгүй бол алдаа гарах магадлалтай.Гэсэн хэдий ч туршилтын дизайн, гүйцэтгэлийг сайтар хийснээр ПГУ нь молекул биологийн хамгийн хүчирхэг хэрэгслийн нэг хэвээр байна.
Шуудангийн цаг: 2023 оны 2-р сарын 22